蒸發(fā)光散射檢測器簡介
發(fā)光散射檢測器( Evaporative Light- scattering Detector,簡稱ELSD)是通用型質量檢測器。能檢測任何揮發(fā)性低
動相的化合物,被廣泛應用于藥物包括中成藥組分以及其它紫外不吸收或弱吸收化學組分的分析檢測。不同于HPLC
的常規(guī)紫外檢測器檢測受化合物的官能團或光學性能的影響,ELSD的獨特檢測原理決定了它的通用性,在無發(fā)光色團樣
品的分析上,性能明顯優(yōu)于紫外檢測器
特別用于檢測人參皂甙、銀杏內酯、黃芪甲甙等中藥組分、紫外不吸收的合成藥物和天然藥物、碳水化合物、氨基酸
類脂化合物和聚合物等。適用于中藥指紋圖譜和各種組合化學的分析研究方法。
恒定流遮的色譜儀(高效液相、逆流色譜、高效毛細管電泳等)洗脫液進入檢測器后,首先被高壓氣流霧化,
成的小液滴進入蒸發(fā)室(漂移管, drift tube),流動相及低沸點的組分被蒸發(fā),剩下高沸點組分的小液滴進入散射池,
過散射池時被散射,散射光被光電管接收形成電信號,電信號通過放大電路、模數(shù)轉換電路、計算機成為色譜工作站的數(shù)
字信號一色譜圖。
ELSD180主要性能特點
通用性高-一可檢測任何揮發(fā)性低于流動相的化合物
靈敏度好一比示差及低波長紫外靈敏
梯度兼容,改善分離及縮短分析時間。
采用分流模式,較低濃度已足夠蒸發(fā)所有溶劑。
可與任何HPLC系統(tǒng)連接使用;使用方便,體積小。
ELSD180工作流程
霧化過程
a、色譜柱流出物通過噴霧器針
c、形成均勻的霧狀液滴(氣溶膠)。
液體流動相在載氣壓力的作用下在露化室內轉變成細
小的液滴,從而使溶劑更易于蒸發(fā)。
液滴的大小和均勻性是保證檢測器的靈敏度和重復性
的重要因素
ELSD180通過對氣壓的精確控制,確保在霧化室內形
成一個較窄的液滴尺寸分布,使液滴蒸發(fā)所需要的溫
度大大降低。
蒸發(fā)過程
a、載氣把液滴從霧化室運送到漂移管進行蒸發(fā)。
b、液滴通過加熱的源移管,溶劑被除去。
C、干燥的樣品顆粒保留
鼓氣把液滴從霧化室運送到漂移管進行蔡發(fā)。
在源移管中,溶劑被除去,留下微粒或純溶質的小滴。
ELSD180采用低溫蒸發(fā)模式,對半揮發(fā)性物質和熱敏
性化合物同樣具有較好的靈敏度
檢測過程
a、樣品顆粒通過淹動池
b、激光“擊”顆粒被散射。
c、光電二極管檢測散射光
粒氣流從源移管出來后進入光檢測池,在檢測
光散射作用,通過光電倍增管進行收集。
溶質顆粒在進入光檢測池時被輔助載氣所包封,避免
溶質在檢測池內的分散和沉淀在壁上,極大增強了檢
測靈敏度,降低了檢測池表面的污染
ELSD180檢測條件優(yōu)化
載氣速和源移管溫度
優(yōu)化的原則
是ELSD中可以調節(jié)的兩個重要參數(shù),建立適當?shù)慕档驮肼暤娇梢越邮艿某潭?并盡量提高信噪比
HPLC-ELSD分析方法需要對這兩個參數(shù)進行優(yōu)化
票移管溫度
載氣流速
源移管溫度對基線水平和噪音的影響并無明顯的規(guī)律性。低
般來說,在其它條件不變的情況下,載氣流速越小
于某一溫度,基線水平較高,因為低于這一溫度,流動相得
形成的物質粒子半徑越大,對激光的散射能力越強,相不到充分揮發(fā),而鹽的加入將會提高這一溫度,因為鹽的揮
應的響應信號越大。但并不是載氣流速越小越好,因為發(fā)需要更高的溫度,但并不是漂移管溫度越高越好,因為溫
當載氣流速太小時,流動相不能完全揮發(fā),背景噪音會度太高會使流動相沸,反而會增加背景噪音,同時還有可
加,信噪比也會降低
能導致溶質的部分揮發(fā),降低信噪比。